ما هي تقنيات إعداد عينات الخلايا الحيوانية للمجهر المجهر؟

يا هناك ، زملائه عشاق المجهر! أنا مورد للمجاهر المجهري ، واليوم متحمس للغاية لمشاركة بعض التقنيات الرائعة لإعداد عينات الخلايا الحيوانية للمجهر المجهر. سواء كنت طالبًا أو باحثًا أو مجرد شخص لديه شغف لاستكشاف العالم المجهري ، فإن هذه النصائح ستساعدك على الحصول على أقصى استفادة من المجهر المجهر.

أولاً ، دعنا نتحدث عن سبب إعداد عينات الخلايا الحيوانية بشكل صحيح. عندما تستخدم مجهر مجهر ، فأنت تريد أن تكون قادرًا على رؤية الخلايا بوضوح وتفصيل. يمكن أن تكشف العينة البئر المعد عن بنية الخلايا ووظيفة الخلايا ، وهو أمر بالغ الأهمية لفهم العمليات البيولوجية.

1. جمع العينات

الخطوة الأولى في إعداد عينات الخلايا الحيوانية هي جمع العينة. يمكن أن يختلف مصدر الخلايا على نطاق واسع. على سبيل المثال ، يمكنك جمع الخلايا من عينة الدم أو خزعة الأنسجة أو حتى من ثقافات الخلايا.

إذا كنت تقوم بجمع الخلايا من عينة دم ، فستحتاج إلى استخدام حقنة معقمة لرسم الدم. تأكد من متابعة جميع بروتوكولات السلامة لتجنب أي تلوث. بمجرد حصولك على الدم ، يمكنك نقله إلى أنبوب اختبار.

بالنسبة لخزعات الأنسجة ، فهي أكثر تعقيدًا قليلاً. ستحتاج إلى استخدام نطرق أو إبرة خزعة للحصول على قطعة صغيرة من الأنسجة. يجب أن يتم ذلك تحت إشراف محترف لضمان القيام به بأمان وصحيح.

تعتبر الثقافات الخلوية خيارًا رائعًا إذا كنت ترغب في دراسة نوع معين من الخلايا. يمكنك شراء خطوط الخلايا من مورد موثوق به وتنميتها في وسط ثقافة. يتيح لك ذلك التحكم في البيئة التي تنمو فيها الخلايا ودراستها في ظل ظروف مختلفة.

2. التثبيت

بعد جمع الخلايا ، فإن الخطوة التالية هي التثبيت. التثبيت هو عملية الحفاظ على الخلايا في حالتها الطبيعية. هذا أمر مهم لأنه يمنع الخلايا من التحلل والحفاظ على هيكلها.

واحدة من أكثر المثبتات شيوعا هو الفورمالديهايد. يمكنك صنع محلول الفورمالديهايد عن طريق تخفيف الفورمالديهايد في الماء. لإصلاح الخلايا ، ستحتاج إلى وضع العينة في الحل التثبت لفترة زمنية معينة. عادةً ما يستغرق هذا حوالي 24 ساعة ، ولكن يمكن أن يختلف حسب نوع الخلايا والمثبت المستخدم.

خيار آخر هو الإيثانول. يمكن أيضًا استخدام الإيثانول كمثبت ، خاصة بالنسبة للخلايا الحساسة للفورمالديهايد. يمكنك استخدام سلسلة من حلول الإيثانول بتركيزات مختلفة للجفاف تدريجياً وإصلاح الخلايا.

3. الجفاف

بمجرد إصلاح الخلايا ، يجب تجفيفها. الجفاف مهم لأنه يزيل الماء من الخلايا ، مما يسمح لهم بتضمينها في وسط صلب لاحقًا.

يمكنك استخدام سلسلة من حلول الإيثانول مع زيادة تركيزات لجفاف الخلايا. ابدأ بمحلول إيثانول منخفض التركيز ، مثل 30 ٪ ، ثم زيادة التركيز تدريجياً إلى 50 ٪ ، 70 ٪ ، 90 ٪ ، وأخيراً 100 ٪. يجب القيام بكل خطوة لفترة زمنية محددة لضمان تجفيف الخلايا بشكل صحيح.

4. التضمين

بعد الجفاف ، تحتاج الخلايا إلى تضمين في وسط صلب. هذا يجعل من السهل قطع أقسام رقيقة من الخلايا للعرض تحت المجهر.

الشمع البارافين هو وسيلة التضمين شائعة الاستخدام. لتضمين الخلايا في شمع البارافين ، ستحتاج أولاً إلى نقل الخلايا المجففة إلى عامل تطهير ، مثل الزيلين. يقوم عامل المقاصة بإزالة الإيثانول من الخلايا ويجعلها شفافة.

بعد ذلك ، ستحتاج إلى وضع الخلايا في شمع البارافين المنصهر. سوف يصلب شمع البارافين وهو يبرد ، مما يؤدي إلى تضمين الخلايا في الداخل. بمجرد أن تكون كتلة البارافين صلبة ، يمكنك استخدام microtome لقطع أقسام رقيقة من الكتلة.

5. المقطع

التقسيم هو عملية قطع شرائح رقيقة من الخلايا المدمجة. يمكن أن يختلف سمك الأقسام حسب نوع الخلايا والتكبير الذي ستستخدمه.

microtome هو أداة متخصصة تستخدم في التقسيم. ستحتاج إلى ضبط microtome بعناية لقطع الأقسام التي يبلغ سمكها حوالي 5 - 10 ميكرومتر. يمكن بعد ذلك وضع هذه الأقسام الرقيقة على شريحة المجهر.

6. تلطيخ

تلطيخ واحدة من أهم الخطوات في إعداد عينات الخلايا الحيوانية. تلطيخ يجعل الخلايا أكثر وضوحا تحت المجهر عن طريق إضافة اللون إلى هياكل مختلفة داخل الخلايا.

هناك العديد من أنواع البقع المختلفة المتاحة. الهيماتوكسيلين و eosin (H&E) هو مزيج من البقع شائعة الاستخدام. هيماتوكسيلين بقع نوى الخلايا الأزرق ، بينما يعلق eosin اللون الوردي السيتوبلازم.

لتلطخ الأقسام ، ستحتاج إلى وضع شريحة المجهر مع الأقسام في طبق تلطيخ. أولاً ، ستطبق وصمة الهيماتوكسيلين لبضع دقائق ، ثم شطف الشريحة بالماء. بعد ذلك ، ستقوم بتطبيق وصمة eosin لفترة قصيرة من الوقت وشطف الشريحة مرة أخرى.

7. تصاعد

الخطوة الأخيرة في إعداد عينات الخلايا الحيوانية هي تصاعد. التثبيت هو عملية تغطية الأقسام الملونة مع ساترة لحمايتها وجعلها أسهل في عرضها.

يمكنك استخدام وسيط التثبيت ، مثل بلسم كندا أو وسيط تثبيت اصطناعي. ضع قطرة من وسط التثبيت على الأقسام الملونة ، ثم ضعها بعناية في الأعلى. تأكد من تجنب أي فقاعات الهواء.

المجاهر ذات العينين للعرض

الآن بعد أن قمت بإعداد عينات خلايا الحيوانات الخاصة بك ، ستحتاج إلى مجهر مجهر جيد لمشاهدتها. كمورد مجهر مجهر ، يمكنني أن أوصي ببعض النماذج الرائعة.

ال40x 2500x مجهر مركب مجهر LEDهو خيار رائع. إنه يوفر مجموعة واسعة من التكبير ، من 40x إلى 2500x ، مما يتيح لك رؤية الخلايا بتفصيل كبير. يوفر إضاءة LED إضاءة مشرقة وحتى ، مما يسهل عرض العينات.

خيار رائع آخر هوGD - 800E (مناظير) ، GD - 800sm (Trinocular). تشتهر هذه المجاهر بصرياتها عالية الجودة والبناء المتين. إنها مناسبة للأغراض التعليمية والبحثية.

إذا كنت تبحث عن مجهر مجهر أكثر عمومية ،مجهر مجهر الضوء المركبهو خيار رائع. إنه سهل الاستخدام ويوفر صورًا واضحة وحادة للعينات.

إذا كنت مهتمًا بشراء مجهر مجهر لاحتياجات عرض عينة الخلايا الحيوانية الخاصة بك ، فلا تتردد في التواصل. نحن هنا لمساعدتك في العثور على المجهر المثالي لمتطلباتك. سواء كنت مبتدئًا أو باحثًا متمرسًا ، لدينا المجهر المناسب لك. اتصل بنا لبدء مناقشة المشتريات وأخذ استكشافك المجهري إلى المستوى التالي!

مراجع

• Alberts ، B. ، Johnson ، A. ، Lewis ، J. ، Raff ، M. ، Roberts ، K. ، & Walter ، P. (2002). البيولوجيا الجزيئية للخلية. علوم إكليل.
• كيرنان ، JA (2008). الأساليب النسيجية والنسيجية: النظرية والممارسة. سبرينغر.
• Prescott ، DM ، Harley ، JP ، & Klein ، DA (2005). علم الأحياء الدقيقة. ماكجرو - هيل.